薄層色譜TLC是吸附色譜,展開過程中,組分在兩相之間發生多次吸附-解吸附平衡,吸附牢的組分隨展開劑移動慢,吸附弱的組分隨展開劑移動快,一段時間后,組分被分離,各組分在薄層板上形成不同距離的斑點。
薄層色譜TLC的實驗步驟:
1)切割薄板。通常,買來的硅膠板都是方形的玻璃板,需用鉆石頭玻璃刀按照模板的形狀進行切割。在切割玻璃之前,用尺子和鉛筆在薄板的硅膠面上輕輕地標出基線的位置(注意不要損壞硅膠面)。借助鋒利的玻璃切割刀和一把引導尺,你便可方便地進行玻璃切割。當整塊玻璃被切割后,你就可以進一步將其分成若干獨立的小塊了。(開始的時候,也許你會感到有一些難度,但經過一些訓練以后,你便會熟練地掌握該項技術。)
2)選取合適的溶劑體系。化合物在薄板上移動距離的多少取決于所選取的溶劑不同。在戊烷和己烷等非極性溶劑中,大多數極性物質不會移動,但是非極性化合物會在薄板上移動一定距離。相反,極性溶劑通常會將非極性的化合物推到溶劑的前段而將極性化合物推離基線。一個好的溶劑體系應該使混合物中所有的化合物都離開基線,但并不使所有化合物都到達溶劑前端,Rf值在0.15~0.85之間。雖然這個條件不一定都能滿足,但這應該作為薄層色譜TLC分析的目標(在柱色譜中,合適的溶劑應該滿足Rf在0.2~0.3之間)。